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波尔山羊超排效果及受胎率影响因素分析

发布时间:2013-04-12 10:47 新闻来源:未知 作者:admin
   胚胎移植(Embryo Transfer,ET)是现代家畜繁殖领域发展较为完善的生物技术,将其运用到育种和养殖生产中,能加快纯种繁育速度,缩短世代间隔,提高良种的推广程度,改善后代性能,提高养殖业的生产水平。波尔山羊(Boer Goat)是当今世界上优秀的肉用山羊之一,以其产肉多、营养价值高、适应性强而倍受欢迎,自上世纪90年代引进中国以来,有力地促进了我国肉羊产业化进程,尤其是胚胎移植技术在波尔山羊纯种繁育上的应用,缩短了我国与先进国家在此领域的差距。胚胎移植效果受供体超数排卵、发情同期化水平、季节、采胚方法、饲养管理水平等因素的制约。本文对影响供体超数排卵和受体受胎率的主要因素进行了分析,与同仁共商。 
  1  供体超数排卵数量、质量影响因素分析 
  超数排卵是胚胎移植最重要的技术环节,能为科研和生产提供大量的优质卵母细胞和胚胎。超数排卵果受激素、个体、环境等因素的影响。 
  1.1  激素对超数排卵效果的影响  用于超数排卵的激素主要有FSH(促卵泡素)、PMSG(孕马血清促性腺激素)、LH(促黄体素)、HCG(绒毛膜促性腺激素)等。不同的处理方案、不同生产厂家、不同剂量均会影响超数排卵效果。生产上常采用FSH递减法。国内FSH的生产厂家主要有宁波市激素制品厂、中国农科院畜牧研究所、中国科学院动物研究所等。张锁林用宁波激素厂FSH对66头波尔山羊采取递减法分4组按不同剂量进行超数排卵,在同期化发情处理后第10~12天肌肉注射FSH连续3天,每天早晚各1次,PGF2。在最后一次注射FSH时注射。采集胚胎数分别为19.5枚(200 u)、26.2枚(240 u)、19.5枚(260u)、19.O枚(320u),超排效果较为理想。赵霞(2001)用宁波激素厂和中科院动物研究所两种FSH进行递减法处理,结果表明:宁波激素制品厂FSH在150 u和180u剂量下都有较好的效果,两者差异不显著,分别采集可用胚(枚)12.85士6.99和12.40±5.74;中科院动物研究所FSH在3.0 mg剂量时有较好的超排效果,优于2.5 mg的剂量,分别采集可用胚胎(枚)11.71±4.53和9.32土4.83。赵晓娥(2002)用宁波激素制品厂和中国农科院畜牧所两种 FSH分别处理波尔山羊,第一方案用中科院FSH 7.5、9.5和10.5 mg3个处理,分别采集胚胎为7、11.67枚和14.25枚;第二方案为宁波FSH+农科院畜牧所FSH,100 u+5.5 mg、100 u+6.5 mg两种处理,分别采集胚胎13.65枚和13.25枚,两方案均有较好的超排效果,但第二方案可降低超排成本。郭晓昭(2004)用FSH(中科院动物研究所)和PMSG(宁波第二激素厂)进行超数排卵试验,于母羊发情的第9~15天,第一方案采用FSH递减法连续3天,总量7.5mg,第二方案一次性注射 PMSG100u,母羊发情后注射HCG400u,随即配种。结果 FSH处理组平均回收胚胎7.3枚,PMSG处理组平均回收胚胎5.5枚。从整体看,FSH处理组卵巢发育良好,排卵整齐,合格率高,而PMSG处理组超排效果差异较大,且有羊只出现卵巢囊肿。综上所述,在生产中用FSH处理波尔山羊可获得较好的超排效果,而PMSG由于半衰期较长,且容易引发卵巢囊肿,因此应与FSH配合使用。宁波市激素制品厂、中国科学院动物研究所、中国农科院畜牧研究所三家所产FSH采用递减法,在150~200 u、2.5~3.0mg、7.5~9.0mg剂量时处理波尔山羊,均可获得10枚以上的超排效果。 
  1.2  采胚方法对超排效果的影响  在不同的时间,采用输卵管冲胚法和子宫角冲胚法,可得到发育阶段不同的胚胎,输卵管冲胚一般在发情后的第2.5~3天进行,可采集到2~8细胞期的胚胎;子宫角冲胚则在发情后的第5.5~6.5天进行,可采集到从紧缩桑椹胚到扩张囊胚期的胚胎。周占琴对波尔山羊作了子宫角与输卵管采卵法的效果比较,发现利用子宫角采卵法采集到的胚胎总量及有效胚胎数低于输卵管采集法。林峰(2005)对64只波尔山羊分别采用输卵管采集法和子宫角采集法,发现输卵管采集法的胚胎回收率明显优于(P<O.01)子宫角采集法,且前者的平均获胚数与平均可用胚数均明显高于(P< O.05)后者。但他们在试验中发现采用子宫角采集法,可用胚因胚龄较大,发育完整,质量较好,移植受胎率较高,且生殖器官发生粘连的比例低于输卵管法。原因是子宫角腔体大,肌肉层厚,一般不出现粘连,即使轻度的粘连还可在妊娠中因子宫的扩张而得以恢复。相反,输卵管细小,则易受损伤而发生粘连,发生粘连的部位多在输卵管和卵巢之间,影响卵子的正常接收和运行,甚者会导致不育。因此,生产中常采用子宫角冲胚法。 
  1.3  供体年龄对超数排卵的影响  供体年龄与超数排卵有密切的关系,在通常情况下,5.5岁以下的波尔山羊,有稳定的超排效果,但当年龄超5.5岁,超排效果变差。原因是老龄化的母羊情期出现不稳定,卵巢机能退化,对外部激素的刺激也随之降低。 
  经产的波尔山羊供体,超排效果优于处女羊。赵晓娥(2002)试验,用FSH递减法对处女羊和经产羊进行超排,处女羊平均胚胎数和可用胚胎数分别为8.8枚和7.6枚,明显低于经产羊12.43枚和10.47枚的水平。张锁林试验经产羊平均回收胚胎16.3枚,远高于处女羊10.3枚的水平,也证实经产羊超排效果优于处女羊。 
  供体羊的选择,以2~5岁、1~4胎较适宜。 
  1.4  供体营养水平对超数排卵的影响  供体的营养状况,尤其是超数排卵前后的营养水平,对正常的发情、排卵、授精效果都有显著的影响。杨异[3]试验,将月龄相当,体重分别为>55 kg、50~55 kg、<50 kg的波尔山羊分别定为上等、中等、下等3种营养状况,进行相同的超排处理,结果分别获得可用胚胎9.33、8.11和8.14枚,营养状况上等的供体可用胚数显著优于中、下等(P<0.01)。赵霞(2001)试验表明,补饲和不补饲条件下供体羊平均采集胚胎数量无显著差异(P>O.05),但补饲条件下供体羊平均采集可用胚胎数量显著高于不补饲(P<O.01),说明超排前加强供体羊饲养管理明显增加可用胚数,提高超排效果。     
  1.5  季节对超排效果的影响  波尔山羊虽为常年发情动物,但处于繁殖季节的卵巢活动最为活跃,体内的激素(主要为孕激素)水平最高,对外部激素刺激较敏感,此阶段进行超排处理,可获得理想效果。张锁林[1]对波尔山羊非繁殖期与繁殖期的对比试验表明:在繁殖季节,波尔山羊对FSH较敏感,卵巢发育为优的占67.7%,远高于非繁殖季节的13.3%,同时,平均获卵数为20.7枚,显著高于非繁殖季节的9.8枚。 
  1.6  与配公羊对超排效果的影响  批量胚胎移植时,若忽视与配公羊的数量与质量,也会影响超排效果。李红用14只波尔山羊公羊配种135只供体母羊,结果表明,各公羊配种后超排效果存在较大差异,其中可用胚率最高达到96.4%,最低为63.3%。因此,建议在生产中选择公羊时,除考虑健康、体质、性欲、精液品质外,还需了解公羊的配种记录,考查可用胚比率,优先选择可用胚率高于80%的公羊。 
  1.7  重复超排对超排效果的影响  波尔山羊量少价高,因此作为供体重复利用就显得尤为重要。周占琴(2003)对32只成年波尔山羊进行重复超排,在繁殖季节,经第一次超排处理,只均回收有效胚胎17.07枚。2个月后分A、B两组进行重复超排, A组FSH未加量,平均只回收胚胎12.93枚,B组FSH用量较第一次增加30%,平均只回收胚胎15.46枚,明显高于A组。结果表明,如果方法适当,重复超排也能达到较好的超排效果。周占琴(2003)做另一试验,采用12只2000年超排效果较好的波尔山羊,在2001年和2002年秋季进行第二、三次重复超排, FSH用量较第一次增加30%,三次平均超排胚胎数量分别为15.50、15.83、13.40枚。结果表明,对波尔山羊进行重复超排,适当增加FSH用量的情况下,可以取得较理想的超排效果。但对体重较小的适龄母羊,在进行初次超排时,应适当降低激素的用量,以防止卵巢上滤泡的过度发育而影响供体的重复使用。生产中,用作重复超排的激素以FSH为最佳,有些应用 PMSG。但有资料表明,使用PMSG对同一个体进行重复超排时,会引发卵巢反应降低,使发育的卵泡数和排卵数有所下降,最终导致不排卵或不产生成熟卵泡。FSH则无此缺点,但两次超排间隔应有几个情期,中间能妊娠一次则更好,这样可有效消除生殖器官的粘连。 
  2  受体受胎率的影响因素分析 
  2.1  发情同期化水平对受胎率的影响  同期发情技术是采用外源激素人为地将一群母羊的发情期进行调整,使之能在预定的时间内集中发情,以便于有计划地实施胚胎移植,供、受体间及受体间发情的同期化水平是移植成功率的关键。 
  2.1.1  不同激素对同期发情的影响  同期发情的处理方法有多种,各方法之间同期发情有效率、发情羊排卵并形成功能黄体比率、发情持续时间都存在一定的差异,经济有效的处理方法,对提高移植成功率,降低移植成本,有至关重要的意义。在众多的处理方案中,药品以孕激素、前列腺素为主,促性腺激素起辅助作用。前列腺素具有溶黄体的功能,但对发情周期异常或处于非黄体期的母羊则无效,因此必须有间隔在11 
天以上的两次使用,方能保证较高的同期发情率。孕激素处理则能克服前列腺素的不足,且阴道栓的使用也较为方便。马保华用3种同期发情方案对2141只(次)受体进行处理,程序1:O天放置阴道栓(西北农大胚胎移植试验室制),第11天撤栓,同时肌注FSH33 u(宁波市激素厂);程序2:0天放置阴道栓,第10天肌注FSH25u,12小时后撤栓,并肌注FSH25 u、PGO.1mg(上海计生所);程序3:O天肌注PGO.1mg,第6天放置阴道栓,第16天肌注FSH25 u,12小时后撤栓,并第二次肌注FSH25u、PGO.1mg。结果表明:3处方案同期发情有效率分别为88.9%、91.9%和96.4%。程序3极显著高于程序1、2(P<0.01)。供、受体羊发情同步差对受胎率有较大影响,发情同期化的实质是排卵的同期化,排卵同期化越高,生殖器官的发育程度越相近,移植的成功率就越高。研究表明,山羊供、受体发情同步差在±24小时之内较好,尤其以一12小时即受体羊撤栓比供体提前12小时为最佳。 
  2.1.2  季节对同期发情的影响  光照是生殖活动最原始、最重要的影响因子,山羊属短日照动物,发情存在明显的季节性,如崂山奶山羊、关中奶山羊,配种集中在9~10月份,占总配种羊数的85%以上,雷州山羊、成都麻羊等南方品种,也主要集中在8~10月份。赵永聚(2004)将316只山羊分为A、B、C、D4组,分别在春、夏、秋、冬做同期发情处理,方法为孕酮阴道栓,处理10~14天取栓,并注射PGF2O.5 mg和FSH25u,结果4组发情率分别为:72.57%、59.55%、94.74%、78.95%,以秋季最高,夏季最低;从发情开始时间看,春、夏季处理组从取栓到出现发情的时间(小时)分别为:43.17±19.85、46.87±17.81,显著晚于秋、冬季的39.26±16.07和30.93±16.26;从发情持续时间看,春、夏、秋处理组分别为39.22士11.63、38.04±11.70、36.89±10.90,都长于冬季的29.87±10.43。因此同期发情以秋季最好。 
  2.2  胚龄对受胎率的影响  不同胚龄的胚胎,会有不同的移植效果。周占琴采用子宫角冲胚法收集到的胚胎,移植受胎率最高可达64.3%,平均受胎率为54.7%,远高于输卵管采集法45%的平均受胎率。杨舁研究表明,分别移植囊胚、囊胚+桑椹胚、桑椹胚不同胚龄的胚胎,受体妊娠率分别为60%、53.2 %和50%。高志敏(2001)试验,移植桑椹胚妊娠率为54.17%、囊胚为80%,也以囊胚为最高。 
  2.3  移胚数量对受胎率的影响  对同一批受体而言,移胚数的多少,影响受体的妊娠率,并决定最终产羔数。马保华吲试验表明,移植1、2、3枚胚胎的受体羊,妊娠率分别达到62.73%、70.50%、66.85%,移植2枚胚胎的受体妊娠率高于移植1枚和3枚。检胚时,一般将胚胎分为A、B两级,其中A为优质胚胎,移植时,可分为两种情况来处理。一是在受体比较充裕的情况下,选择A组胚胎进行单胚移植,虽然妊娠率相对较低,但胚胎成羔率较高,可保证最终的产羔数;二是胚胎数量充足而受体数量相对较少的情况下,先移植2枚质量较好的胚胎,或A、B级胚胎按照多数1A+2B,部分2A+1B的方法搭配移植,也可获得较高的妊娠率。虽然胚胎成羔率较移植1枚时低,但在尽可能多产羔的情况下,缓解了受体的数量矛盾。 
  2.4  不同受体品种对受胎率的影响  我国山羊品种众多,不同品种山羊作为受体时对受胎率的影响差异研究,报道不多,但不同山羊之间生产性能、繁殖能力等方面有较大区别,若选择恰当的山羊作受体,可能会对胚胎移植产生积极影响。马保华采用雅安奶山羊、成都麻羊、间阳大耳羊和南江黄羊等4个山羊品种作为波尔山羊移植受体。结果表明:各品种受体移植单胚时妊娠率和胚胎成羔率均无显著差异;移植双胚时受体妊娠率分别为69.6%、51.9%、68.5%、68.8%,奶山羊移植效率显著高于成都麻羊,简阳大耳羊、南江黄羊低于奶山羊,高于成都麻羊。此外,考虑到波尔山羊羔羊初生重大,在选择受体时以体格较大、产奶量高、母性好的山羊作为优先选择,如萨能奶山羊、关中奶山羊等。 
  2.5  饲养管理水平对移植效果的影响  饲养管理是正常繁殖活动的基本条件,再先进的繁殖技术也不能代替优良的饲养管理,相反,先进的繁殖技术只能在此前提下才能表现出应有的效果。赵霞(2001)做了不同饲养管理条件对受胎率的影响试验,将385枚胚胎移植给326只受体羊,并分为两组进行饲养管理,第一组受体羊放牧后每只补饲150g精料,第二组受体羊只放牧不补饲。结果表明:补饲与不补饲情况下的产羔率分别为81%和76.1%,平均初生重分别为4.8kg和3.5kg,差异显著。张红做了管理水平不同的5个羊场胚胎移植试验,受体羊均为奶山羊,试验表明,饲养管理较差的羊场Ⅱ,胚胎成羔率为49.2%,显著低于饲养管理较好的羊场Ⅲ(60.5%)和羊场Ⅳ(67.9%),且一月龄羔羊存活率明显低于其它羊场。说明良好的饲养管理,既能保证受体较高的同期发情率和产羔率,亦能保证产后羔羊的正常生长,从而实现了胚胎移植的根本目的。 
  胚胎移植是涉及生产各领域的一项繁殖技术,影响因素很多,除本文述及的内容外,还包括鲜胚与冻胚、手术熟练熟悉、环境温度、胚胎存放时间等多种影响因素,由于篇幅所限,本文不作赘述。 

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